酸碱性预测
将每个酸性氨基酸赋值为-1,包括天冬氨酸(D)、谷氨酸(E)、以及C端-COOH。每个碱性氨基酸赋值为+1,包括精氨酸(R)、赖氨酸(K)、组氨酸(H)以及N端-NH2。然后计算整个多肽的电荷数。
按上述方法计算:如果整段肽的赋值为正,说明所带电荷是正电荷,该肽是碱性的;如果整段肽的赋值为负,说明所带电荷是负电荷,该肽是酸性的;如果赋值为零,该肽是中性的。
溶解方法选择
溶解性是使用多肽时比较重要的问题。每个氨基酸都有其固有化学特性。如亮氨酸Leu、异亮氨酸Ile、颉氨酸Val是疏水性的,其他氨基酸如赖氨酸Lys、组氨酸His、精氨酸Arg是碱性亲水的,再如谷氨酸Glu、天冬氨酸Asp是酸性亲水的。因此不同的多肽因其组成不同而具有不同的溶解性。
一般情况下,多肽首先选择溶解在灭菌的蒸馏水或去离子水中。
如果这个肽是不溶于水的,且其是酸性的,加入温和的碱如0.1%的NH3.H2O能够增加肽的溶解度。相反,对于碱性的肽,温和的酸如0.1%的醋酸或TFA(三氟乙酸)能够帮助多肽溶解。
某些肽具有很高的疏水性时,不易溶解,可以用少量的DMF或DMSO帮助其溶解,这时推荐将多肽溶解于少量纯有机溶剂,然后用水或缓冲液将其稀释到正常的工作浓度。因为盐会导致疏水性多肽的聚合,所以必须在多肽完全溶解后加入缓冲液进一步稀释。当您遇到这种情况时,请您注意以下几点说明:
a. DMF或DMSO的使用有助于多肽的溶解,这是通过破坏多肽的二级结构而助溶。
b. 这种试剂的使用可能会对其生物活性及后续的研究工作造成干扰,请您在溶解时考虑此问题。
如果溶解还是有问题,声波降解有助于溶解多肽。如果需要用到有机试剂溶解,建议在多肽加入有机试剂后即开始用超声波助溶,溶解后再加入水或缓冲液稀释,稀释过程中再次使用超声波助溶。
如果您在使用多肽产品时溶解性问题或其它问题,欢迎咨询,我们会提供最好的服务。